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技術(shù)文章

如何解決國產(chǎn)液相色譜儀重現性差的問(wèn)題

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在高效液相色譜法的試驗過(guò)程中,有時(shí)會(huì )有異常色譜峰的出現以及重現性不好的問(wèn)題,這主要是由于操作方法不當所引起,要想解決此類(lèi)問(wèn)題,需從以下幾個(gè)方面入手。

  

1、進(jìn)樣量的控制。用進(jìn)樣閥來(lái)進(jìn)樣時(shí),閥內的樣品環(huán)是定量的,(一般分析型進(jìn)樣閥的樣品環(huán)體積為20ul),由于進(jìn)樣時(shí),注射到進(jìn)樣閥內的樣品溶液在樣品環(huán)的管路中有徑向的速度梯度(即管軸處比管壁處的液流速度快)。因此,要想使樣品環(huán)中充滿(mǎn)樣品溶液,從而使用進(jìn)樣閥來(lái)準確地定量,則必須使進(jìn)樣量大于樣品環(huán)體積的2倍。如果用注射器來(lái)控制進(jìn)樣量,則大只能注射樣品環(huán)體積1/2的量,這樣才能防止部分樣品由溢流管溢出從而導致定量分析的誤差。

 

2、進(jìn)樣閥的清潔問(wèn)題。如果樣品環(huán)中有上次進(jìn)樣時(shí)樣品的殘留,必然會(huì )污染下次注射進(jìn)的樣品,為防止這種現象的發(fā)生,應按下列步驟操作:a.進(jìn)樣閥有2個(gè)位置,INJECT和LOAD。首先在LOAD位置時(shí),以注射器將流動(dòng)相注入進(jìn)樣閥內清洗幾次,每次用量大約40ul;b.然后將進(jìn)樣閥板手扳至INJECT位置時(shí),再以流動(dòng)相清洗幾次,每次用量還是40ul;c.后,再將樣品注射到進(jìn)樣閥里。按照上述的步驟操作,可以避免由進(jìn)樣閥引起的污染,從而使干擾峰消除并提高分析結果的準確性。

 

3、進(jìn)樣閥溢流管的堵塞。有時(shí),進(jìn)樣閥的溢流管會(huì )發(fā)生堵塞現象,向進(jìn)樣閥內注射樣品時(shí),注射針推不動(dòng)。此故障是由于溢流管的堵塞所致。堵塞的原因多半是由于溶解樣品的流動(dòng)相用的是鹽溶液,而其中的鹽在溢流管的排空端口處結晶所致。此時(shí),可用小燒杯盛少量蒸餾水對溢流管口稍加浸泡,端口處鹽的結晶就能被溶解掉,故障排除。如能在每次進(jìn)樣完成之后,用蒸餾水反復沖洗至溢流管中的鹽分全部沖出,則可避免此故障的發(fā)生。


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